原种、栽培种制作、使用中异常情况及原因分析_技术专栏_梁山正大菌业

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原种、栽培种制作、使用中异常情况及原因分析
原种、栽培种制作、使用中异常情况及原因分析
食用菌栽培技术----原种、栽培种制作、使用中异常情况及原因分析
(一)接种物萌发不正常
1、表现
菌种不萌发或萌发缓慢
萌发出的菌丝纤细无力,扩展缓慢
2、原因
培养温度过高
含水量过低
培养基原料霉变:霉变产生有害物质,耐热性极强,在高温下不易分解变性。
灭菌不彻底:培养基的颗粒间可见到灰白色的菌膜
菌龄过长:母种最佳菌龄长满斜面后1-5天,原种的最佳菌龄在长满瓶(袋)14天之内。 
(二)发菌不良
1、表现
生长缓慢;生长过快但菌丝纤细稀疏,生长不均匀,菌丝不饱满,色泽灰暗。
2、原因
培养基酸碱度不适
原料中混有有害物质
灭菌不彻底
水分含量不当:装料过紧,水分过大,透气性过差
培养室环境不适:温湿度过高,空气流通交换不够
(三)杂菌污染
1、灭菌不彻底
培养基的原料性质:糖、脂肪和蛋白质含量越高,传热性越差,灭菌时间:木屑﹤草料﹤木塞﹤粪草﹤谷粒。
培养基的含水量和均匀度
容器:玻璃瓶较塑料袋热传导慢。 
灭菌方法:粪草种和谷粒种不适合常压灭菌。
灭菌容量和堆放方式
2、封盖不严:罐头瓶作容器的菌种;用塑料袋作容器的折角处。
3、接种物带杂:批量污染,杂菌从菌种块上长出,污染的杂菌种类比较一致,且出现早,接种3-5天内就可用肉眼鉴别。
4、设备设施过于简陋引起灭菌后无菌状态的改变
生产设备和生产环节分散,又往往忽略场地的环境卫生,忽视冷却场地的洁净度;
冷却场地如果灰尘过多,杂菌孢子基数过大,杂菌孢子就很自然地落到了种瓶或种袋的表面,而且随其内外气压的动态平衡向瓶内、袋内移动,当棉塞受潮后就更容易先在棉塞上定植,接种操作时碰触沉落进入瓶内或袋内。
5、接种操作污染
(1)特点:分散出现在培养基表面,发生较晚,一般接种后7天左右出现。
(2)污染源:接种室空气和种瓶、种袋冷却中附在表面的杂菌,接种操作人员自身洁净度不良(违反操作规程、无专用无菌工作服、工作服表面附着尘土和杂菌孢子,不戴口罩和工作帽,手臂消毒不良等)。
(3)防止措施
不使棉塞打湿
洁净冷却:高度无菌
接种室和接种箱使用前必须严格消毒
操作人员须在缓冲间穿戴专用衣帽
接种过程要严格无菌操作
在火焰上方接种
拔出棉塞使缓劲
湿塞换干塞
接种前做好一切准备工作
少量多次
未经灭菌的物品切勿进入无菌的瓶内或袋内
6、培养环境不洁及高湿
特点:
接种后污染率很低,随着培养时间的延长,污染率逐渐增高。
这种污染较大量发生在接种10天以后,甚至培养基表面都已长满菌丝后贴瓶壁处陆续出现污染菌落。
这种污染多发生在湿度高、灰尘多、洁净度不高的培养室。
(四)原种、栽培种制作的注意事项
1、培养基含水量
通常要求培养基含水量在60-65%之间。
2、培养基的pH值
木腐菌要求偏酸性,即pH值4-6,粪草菌要求中性或偏碱性,即pH值为7.0-7.2。
可用1%过磷酸钙澄清液或1%石灰水上清液进行调节。  
3、装瓶(袋)的要求
原种的培养料要紧一些、浅一些,略占瓶深3/4即可;
栽培种的培养料要松一些、深一些,可装至瓶颈以下。
4、装好的培养基应及时灭菌
5、严格检查所使用菌种的纯度和生活力
6、菌种长满菌瓶后,应及时使用
原种满瓶后7-8天,最适于扩转栽培种,栽培种满瓶(袋)7-15天时最适于接种。
如不能及时使用,菌种应在凉爽、干燥、清洁的室内避光保藏。
在10℃以下低温保藏时,二级种不能超过3个月,三级种不能超过2个月。
(五)菌种杂菌污染的综合控制
1、从有信誉的科研、专业机构引进优良、可靠的母种,做到种源清楚、性状明确、种质优良,做好先做出菇试验,做到使用一代、试验一代、储存一代。
2、按照菌种生产各环节的要求,合理、科学地规划和设计厂区布局,配置专业设施、设备,提高专业化、标准化、规范化生产水平。
3、严格按照菌种生产的技术规程进行选料、配料、分装、灭菌、冷却、接种、培养和质量检测。
4、严格挑选用于扩大生产的菌种,任何疑点都不可姑息,确保接种物的纯度。
5、提高从业人员专业素质,规范操作;生产场地要定期清洁、消毒,保持大环境的清洁状态。
6、专业菌种场要建立技术管理规章制度,确保技术的准确到位,保证生产。
(六)制种中应注意的几个问题
1、含水量
生产上最适含水量低于生物学的最适含水量。
在偏低含水量基质上生长的菌种,栽培中萌发快、定植快、抗性强、活力强、易管理。
菌种生产中基质含水量应适当偏低。
2、种源的检查
种源使用前,认真检查瓶口、棉塞是否洁净,可用放大镜观察是否带螨。
3、分装与搬运
容器分装时切忌过多,确保灭菌后培养基表面下端或瓶口(不用棉塞的情况)3cm左右,减少外来杂菌污染。
原种和栽培种边分装边装筐,整筐搬运、整筐灭菌、整筐冷却、整筐接种,减少散装散运导致的污染。
4、洁净冷却
切忌使用扫帚清洁导致扬尘造成灭菌后的菌种瓶(袋)表面落尘污染。
地面和内壁清洁外,要喷洁净水沉落空气中的灰尘。出入换鞋,严防外来污染源和灰尘的进入。
5、培养
培养期间切忌高温,宁低勿高。
培养环境要洁净,培养室使用前要灭虫、消毒、清洁,净水喷雾净化空气。
接种48-72小时内开始进行菌种生长情况的检查,长满表面前进行第二次检查,长满瓶(袋)前至少进行3吃的逐瓶(袋)检查,及时淘汰不良个体。
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